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UMNSAH/DF-1(雞胚成纖維細(xì)胞)在生物反應(yīng)器中的大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)優(yōu)化

更新時(shí)間:2025-08-14  |  點(diǎn)擊率:637

UMNSAH/DF-1細(xì)胞是源自10日齡家雞胚胎的自發(fā)永生化雞胚成纖維細(xì)胞株,經(jīng)原代分離及長(zhǎng)期傳代培養(yǎng)篩選獲得。該細(xì)胞株兼具成纖維細(xì)胞的典型特征與永生化細(xì)胞的穩(wěn)定增殖能力,在生物醫(yī)學(xué)研究中展現(xiàn)出獨(dú)-特優(yōu)勢(shì),尤其適用于病毒學(xué)研究、重組蛋白表達(dá)及疫苗生產(chǎn)等領(lǐng)域。

UMNSAH/DF-1雞胚成纖維細(xì)胞特性

基礎(chǔ)屬性

種屬:家雞(Gallus gallus domesticus

細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣,呈梭形或星形貼壁生長(zhǎng)

生長(zhǎng)特性:接觸抑制明顯,但永生化特性保障長(zhǎng)期傳代穩(wěn)定性

生物安全等級(jí):BSL-1

關(guān)鍵優(yōu)勢(shì)

非轉(zhuǎn)化性安全:軟瓊脂集落形成試驗(yàn)證實(shí)無(wú)致瘤性(免疫缺陷小鼠模型及半固體培養(yǎng)基中均未觀察到腫瘤形成)

溫度敏感性可控:專為禽類體溫設(shè)計(jì)(38-40℃),39℃為最佳培養(yǎng)溫度,避免37℃培養(yǎng)導(dǎo)致的狀態(tài)衰退

高穩(wěn)定性:經(jīng)超過(guò)30代傳代驗(yàn)證,基因型與表型保持高度一致

培養(yǎng)指南

培養(yǎng)體系

基礎(chǔ)培養(yǎng)基:DMEM(PM150210)

血清補(bǔ)充:10% FBS(164210)

抗生素:1%雙抗(PB180120)

氣體環(huán)境:5% CO? + 95%空氣

推薦傳代比例:1:3至1:8(每2-3天)

關(guān)鍵操作要點(diǎn)

溫度控制

必須使用專用培養(yǎng)箱(38-40℃),溫度波動(dòng)易誘發(fā)細(xì)胞空泡化

收貨后可能出現(xiàn)短暫空泡,穩(wěn)定培養(yǎng)2-3代可恢復(fù)

凍存與復(fù)蘇

凍存液配方:55%基礎(chǔ)培養(yǎng)基 + 40%FBS + 5%DMSO

液氮長(zhǎng)期保存,復(fù)蘇時(shí)快速融化并離心去除DMSO

換液頻率:每2-3天更換新鮮培養(yǎng)基,維持營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)

應(yīng)用領(lǐng)域

病毒學(xué)研究

作為禽類病毒(如禽-流感病毒、馬立克氏病病毒)增殖的優(yōu)選基質(zhì)

支持病毒滴度測(cè)定與疫苗株篩選

重組蛋白生產(chǎn)

高表達(dá)效率適用于禽源蛋白(如卵清蛋白、干擾素)的規(guī)模化制備

基因功能研究

適用于CRISPR/Cas9基因編輯及穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建

疫苗開發(fā)

作為重組病毒載體疫苗的生產(chǎn)平臺(tái)(如腺病毒載體)

質(zhì)量控制

細(xì)胞身份驗(yàn)證:STR基因分型與種屬特異性PCR確認(rèn)

微生物檢測(cè):無(wú)菌、支原體、病毒病原體陰性

活力保證:復(fù)蘇后存活率≥90%,傳代穩(wěn)定性驗(yàn)證≥10代

來(lái)源追溯:ATCC保藏編號(hào)CRL-12203,全程可溯源

注意事項(xiàng)

避免37℃培養(yǎng),建議配置專用培養(yǎng)箱

傳代時(shí)消化時(shí)間控制在2-3分鐘,避免過(guò)度刮取損傷細(xì)胞

凍存管標(biāo)注清晰,嚴(yán)格遵循液氮保存規(guī)范

細(xì)胞信息

產(chǎn)品編號(hào):UMNSAH/DF-1

保藏機(jī)構(gòu):ATCC(CRL-12203)

推薦配套試劑

專用培養(yǎng)基套裝(含DMEM+FBS+雙抗)

細(xì)胞凍存液(預(yù)混型)

  1. UMNSAH/DF-1細(xì)胞以其獨(dú)-特的溫度適應(yīng)性和非致瘤特性,成為禽類細(xì)胞模型中的標(biāo)-桿工具。嚴(yán)格遵循本指南操作,可最大限度發(fā)揮其在科研與工業(yè)應(yīng)用中的價(jià)值。


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